oprm_mouse

NAME

4DKL

ORGANISM

Mouse (Mus musculus)

PROTEIN NAME

oprm_mouse

SOURCE

SWISSPROT

SEQUENCE

Perspective: Wild-type Construct

 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
N-term        
M
D
S
S
A
G
P
G
N
I
10
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
                   
S
D
C
S
D
P
L
A
P
A
20
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
                   
S
C
S
P
A
P
G
S
W
L
30
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
                   
N
L
S
H
V
D
G
N
Q
S
40
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
                   
D
P
C
G
P
N
R
T
G
L
50
 
                  
                   
G
G
S
H
S
L
C
P
Q
T
60
                   
        TM1      
G
S
P
S
M
V
T
A
I
T
70
                   
                   
I
M
A
L
Y
S
I
V
C
V
80
                   
                   
V
G
L
F
G
N
F
L
V
M
90
                   
            ICL1
Y
V
I
V
R
Y
T
K
M
K
100
                   
TM2              
T
A
T
N
I
Y
I
F
N
L
110
                   
                   
A
L
A
D
A
L
A
T
S
T
120
                   
                   
L
P
F
Q
S
V
N
Y
L
M
130
                   
  ECL1 TM3    
G
T
W
P
F
G
N
I
L
C
140
                   
                   
K
I
V
I
S
I
D
Y
Y
N
150
                   
                   
M
F
T
S
I
F
T
L
C
T
160
                   
                   
M
S
V
D
R
Y
I
A
V
C
170
                   
  ICL2          
H
P
V
K
A
L
D
F
R
T
180
                   
TM4              
P
R
N
A
K
I
V
N
V
C
190
                   
                   
N
W
I
L
S
S
A
I
G
L
200
                   
            ECL2
P
V
M
F
M
A
T
T
K
Y
210
                   
                   
R
Q
G
S
I
D
C
T
L
T
220
                   
      TM5        
F
S
H
P
T
W
Y
W
E
N
230
                   
                   
L
L
K
I
C
V
F
I
F
A
240
                   
                   
F
I
M
P
V
L
I
I
T
V
250
                   
                   
C
Y
G
L
M
I
L
R
L
K
260
     
 
 
 
 
 
 
  
    ICL3   TM6
S
V
R
M
L
S
G
S
K
E
270
                   
                   
K
D
R
N
L
R
R
I
T
R
280
                   
                   
M
V
L
V
V
V
A
V
F
I
290
                   
                   
V
C
W
T
P
I
H
I
Y
V
300
                   
            ECL3
I
I
K
A
L
I
T
I
P
E
310
                   
TM7              
T
T
F
Q
T
V
S
W
H
F
320
                   
                   
C
I
A
L
G
Y
T
N
S
C
330
                   
                   
L
N
P
V
L
Y
A
F
L
D
340
                   
H8                
E
N
F
K
R
C
F
R
E
F
350
                   
    C-term    
C
I
P
T
S
S
T
I
E
Q
360
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
                   
Q
N
S
A
R
I
R
Q
N
T
370
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
                   
R
E
H
P
S
T
A
N
T
V
380
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
                   
D
R
T
N
H
Q
L
E
N
L
390
 
 
 
 
 
 
 
 
               
E
A
E
T
A
P
L
P
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
FLAG            
 
                  
  N-term      
 
G
S
H
S
L
C
P
Q
T
60
                   
        TM1      
G
S
P
S
M
V
T
A
I
T
70
                   
                   
I
M
A
L
Y
S
I
V
C
V
80
                   
                   
V
G
L
F
G
N
F
L
V
M
90
                   
            ICL1
Y
V
I
V
R
Y
T
K
M
K
100
                   
TM2              
T
A
T
N
I
Y
I
F
N
L
110
                   
                   
A
L
A
D
A
L
A
T
S
T
120
                   
                   
L
P
F
Q
S
V
N
Y
L
M
130
                   
  ECL1 TM3    
G
T
W
P
F
G
N
I
L
C
140
                   
                   
K
I
V
I
S
I
D
Y
Y
N
150
                   
                   
M
F
T
S
I
F
T
L
C
T
160
                   
                   
M
S
V
D
R
Y
I
A
V
C
170
                   
  ICL2          
H
P
V
K
A
L
D
F
R
T
180
                   
TM4              
P
R
N
A
K
I
V
N
V
C
190
                   
                   
N
W
I
L
S
S
A
I
G
L
200
                   
            ECL2
P
V
M
F
M
A
T
T
K
Y
210
                   
                   
R
Q
G
S
I
D
C
T
L
T
220
                   
      TM5        
F
S
H
P
T
W
Y
W
E
N
230
                   
                   
L
L
K
I
C
V
F
I
F
A
240
                   
                   
F
I
M
P
V
L
I
I
T
V
250
                   
                   
C
Y
G
L
M
I
L
R
L
K
260
     
 
    ICL3
S
V
R
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
               
TM6          
E
K
D
R
N
L
R
R
277
                   
                   
I
T
R
M
V
L
V
V
V
A
287
                   
                   
V
F
I
V
C
W
T
P
I
H
297
                   
                   
I
Y
V
I
I
K
A
L
I
T
307
                   
ECL3 TM7      
I
P
E
T
T
F
Q
T
V
S
317
                   
                   
W
H
F
C
I
A
L
G
Y
T
327
                   
                   
N
S
C
L
N
P
V
L
Y
A
337
                   
    H8            
F
L
D
E
N
F
K
R
C
F
347
                   
                   
R
E
F
C
I
P
T
S
S
T
357
     
 
C-term
I
E
Q
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
P                  
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
His(8)        

SCHEMATIC

Perspective: Wild-type Construct

 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
N-term
 
TM1
 
ICL1
 
TM2
 
ECL1
 
TM3
 
ICL2
 
TM4
 
ECL2
 
TM5
 
 
 
 
 
ICL3
 
 
TM6
 
ECL3
 
TM7
 
H8
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
C-term

 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
FLAG
 
 
 N-term
 
TM1
 
ICL1
 
TM2
 
ECL1
 
TM3
 
ICL2
 
TM4
 
ECL2
 
 
TM5 
 
ICL3
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
T4 Lys
 
TM6
 
ECL3
 
TM7
 
H8
 
 
C-term 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
P
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
His(8)


DIAGRAMS

ICL1 T K M K ICL1ECL1 T W P F ECL1ICL2 P V K A L D F R ICL2ECL2 T T K Y R Q G S I D C T L T F S H ECL2ICL3 R M L S G ICL3ECL3 T I P E ECL3N-term M D S S A G P G N I S D C S D P L A P A S C S P A P G S W L N L S H V D G N Q S D P C G P N R T G L G G S H S L C P Q T G S P S N-termC-term P T S S T I E Q Q N S A R I R Q N T R E H P S T A N T V D R T N H Q L E N L E A E T A P L P C-term M V T A I T I M A L Y S I V C V V G L F G N F L V M Y V I V R Y T A T N I Y I F N L A L A D A L A T S T L P F Q S V N Y L M G G N I L C K I V I S I D Y Y N M F T S I F T L C T M S V D R Y I A V C H T P R N A K I V N V C N W I L S S A I G L P V M F M A P T W Y W E N L L K I C V F I F A F I M P V L I I T V C Y G L M I L R L K S V S K E K D R N L R R I T R M V L V V V A V F I V C W T P I H I Y V I I K A L I T T F Q T V S W H F C I A L G Y T N S C L N P V L Y A F L D E N F R E F K R C F C I

MUTATIONS

Position Wild-type Mutated

DELETIONS

  • from 1 to 51
  • from 264 to 269
  • from 361 to 398

    • MODIFICATIONS


    AUXILIARY PROTEINS

    Protein_type: tag

    Name: FLAG
    Sequence: None
    Deletions:
    Positions: N-term_0 None:None
    Presence in Crystal:NO
    Remarks: None

    Protein_type: prot_cleavage

    Name: TEV protease
    Sequence: None
    Deletions:
    Positions: Within Receptor_1 51:51
    Presence in Crystal:NO
    Remarks: None

    Protein_type: fusion

    Name: T4 Lysozyme (T4L)
    Sequence: None
    Deletions:
    Positions: Within Receptor_2 264:269
    Presence in Crystal:YES
    Remarks: None

    Protein_type: linker

    Name: P
    Sequence: None
    Deletions:
    Positions: C-term_3 None:None
    Presence in Crystal:YES
    Remarks: None

    Protein_type: tag

    Name: His(8)
    Sequence: None
    Deletions:
    Positions: C-term_4 None:None
    Presence in Crystal:NO
    Remarks: None

    EXPRESSION

    Expression method Host cell type Host cell Remarks
    Baculovirus Sf9 Insect

    SOLUBILIZATION

    Solvent type Item Concentration
    detergent DDM 0.5 %w/v
    additive CHAPS 0.3 %w/v
    additive CHS 0.03 %w/v

    Remarks:

    PURIFICATION

    Purification type Description
    Alkylation by Iodoacetamide None
    Proteolysis by TEV protease None
    Detergent exchange to 0.01% LMNG ( lauryl maltose neopentyl glycol) None
    Proteolysis by carboxypeptidase None

    Remarks:None

    CRYSTALLIZATION

    METHOD: in meso/LCP
    TYPE: lipidic cubic phase (LCP) (monoolein (9.9 MAG))
    PROTEIN CONCENTRATION: 30 mg/ml
    Temperature: 20°C
    ph : 7.0-7.0

    Remarks: 10:1monoolein:cholesterol (Sigma) in a ratio of 1:1.5 parts by weight receptor:lipid mixture

    Chemical lists

    Type Item Concentration
    Additional
    unknown HEPES pH7.0 100 mM
    unknown Lithium Sulfate 300 mM
    unknown PEG400 30-38 % v/v
    unknown DMSO 7.5 %
    Detergent
    detergent LMNG 0.01 %
    Lipid
    lipid CHS 0.001 %