crfr1_human

NAME

4K5Y

ORGANISM

Human (Homo sapiens)

PROTEIN NAME

crfr1_human

SOURCE

SWISSPROT

SEQUENCE

Perspective: Wild-type Construct

 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
N-term        
M
G
G
H
P
Q
L
R
L
V
10
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
                   
K
A
L
L
L
L
G
L
N
P
20
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
                   
V
S
A
S
L
Q
D
Q
H
C
30
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
                   
E
S
L
S
L
A
S
N
I
S
40
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
                   
G
L
Q
C
N
A
S
V
D
L
50
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
                   
I
G
T
C
W
P
R
S
P
A
60
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
                   
G
Q
L
V
V
R
P
C
P
A
70
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
                   
F
F
Y
G
V
R
Y
N
T
T
80
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
                   
N
N
G
Y
R
E
C
L
A
N
90
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
                   
G
S
W
A
A
R
V
N
Y
S
100
 
 
 
              
    TM1          
E
C
Q
E
I
L
N
E
E
K
110
                 
 
                   
K
S
K
V
H
Y
H
V
A
V
120
                   
                   
I
I
N
Y
L
G
H
C
I
S
130
                   
                   
L
V
A
L
L
V
A
F
V
L
140
     
 
            
        ICL1    
F
L
R
L
R
S
I
R
C
L
150
         
 
      
 
TM2              
R
N
I
I
H
W
N
L
I
S
160
                   
                   
A
F
I
L
R
N
A
T
W
F
170
                   
          ECL1  
V
V
Q
L
T
M
S
P
E
V
180
                   
        TM3      
H
Q
S
N
V
G
W
C
R
L
190
                   
                   
V
T
A
A
Y
N
Y
F
H
V
200
                   
                   
T
N
F
F
W
M
F
G
E
G
210
                 
 
                   
C
Y
L
H
T
A
I
V
L
T
220
 
 
 
        
 
    
ICL2   TM4    
Y
S
T
D
R
L
R
K
W
M
230
                   
                   
F
I
C
I
G
W
G
V
P
F
240
                   
                   
P
I
I
V
A
W
A
I
G
K
250
                 
 
        ECL2    
L
Y
Y
D
N
E
K
C
W
F
260
                   
              TM5
G
K
R
P
G
V
Y
T
D
Y
270
           
 
      
                   
I
Y
Q
G
P
M
I
L
V
L
280
                   
                   
L
I
N
F
I
F
L
F
N
I
290
                   
                   
V
R
I
L
M
T
K
L
R
A
300
               
 
  
ICL3 TM6      
S
T
T
S
E
T
I
Q
Y
R
310
                   
                   
K
A
V
K
A
T
L
V
L
L
320
                 
 
                   
P
L
L
G
I
T
Y
M
L
F
330
                   
    ECL3   TM7
F
V
N
P
G
E
D
E
V
S
340
               
 
  
                   
R
V
V
F
I
Y
F
N
S
F
350
                   
                   
L
E
S
F
Q
G
F
F
V
S
360
   
 
              
            H8    
V
F
Y
C
F
L
N
S
E
V
370
     
 
 
 
 
 
 
 
                   
R
S
A
I
R
K
R
W
H
R
380
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
                   
W
Q
D
K
H
S
I
R
A
R
390
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
    C-term    
V
A
R
A
M
S
I
P
T
S
400
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
                   
P
T
R
V
S
F
H
S
I
K
410
 
 
 
 
 
         
Q
S
T
A
V
 
                  
  TM1            
 
E
I
L
N
E
E
K
K
S
112
             
 
    
                   
K
V
H
Y
H
V
A
A
I
I
122
                   
                   
N
Y
L
G
H
C
I
S
L
V
132
                   
                   
A
L
L
V
A
F
V
L
F
L
142
 
 
                
    ICL1 TM2  
R
A
R
S
I
R
C
L
R
N
152
     
 
      
 
    
                   
I
I
H
A
N
L
I
A
A
F
162
                   
                   
I
L
R
N
A
T
W
F
V
V
172
                   
      ECL1      
Q
L
T
M
S
P
E
V
H
Q
182
                   
    TM3          
S
N
V
G
W
C
R
L
V
T
192
                   
                   
A
A
Y
N
Y
F
H
V
T
N
202
                   
                   
F
F
W
M
F
G
E
G
C
Y
212
             
             
L
H
T
A
I
V
L
219
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
T4 Lysozyme
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
        
 
    
ICL2 TM4    
T
 
D
R
L
R
A
W
M
230
                   
                   
F
I
C
I
G
W
G
V
P
F
240
                   
                   
P
I
I
V
A
W
A
I
G
K
250
                 
 
        ECL2    
L
Y
Y
D
N
E
K
C
W
A
260
                   
              TM5
G
K
R
P
G
V
Y
T
D
Y
270
           
 
      
                   
I
Y
Q
G
P
M
A
L
V
L
280
                   
                   
L
I
N
F
I
F
L
F
N
I
290
                   
                   
V
R
I
L
M
T
K
L
R
A
300
               
 
  
ICL3 TM6      
S
T
T
S
E
T
I
Q
A
R
310
                   
                   
K
A
V
K
A
T
L
V
L
L
320
                 
 
                   
P
L
L
G
I
T
Y
M
L
A
330
                   
    ECL3   TM7
F
V
N
P
G
E
D
E
V
S
340
               
 
  
                   
R
V
V
F
I
Y
F
N
A
F
350
                   
                   
L
E
S
F
Q
G
F
F
V
S
360
   
 
              
            H8    
V
F
A
C
F
L
N
S
E
V
370
     
 
       
R
S
A
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
AAA              
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
His(10)      

SCHEMATIC

Perspective: Wild-type Construct

 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
N-term
 
 
 
 
 
TM1
 
ICL1
 
 
 
 
 
TM2
 
ECL1
 
TM3
 
 
 
 
 
ICL2
 
 
 
TM4
 
 
 
ECL2
 
 
 
TM5
 
ICL3
 
 
 
 
TM6
 
ECL3
 
 
 
 
 
TM7
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
H8
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
C-term

 
 
 
 
 
 
 
 TM1
 
ICL1
 
 
 
 
 
TM2
 
ECL1
 
 
TM3 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
T4 Lys
 
 
ICL2
 
 
 
TM4
 
 
 
ECL2
 
 
 
TM5
 
ICL3
 
 
 
 
TM6
 
ECL3
 
 
 
 
 
TM7
 
 
H8 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
AAA
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
His(10


DIAGRAMS

ICL1 R S I R ICL1ECL1 M S P E V H Q S N ECL1ICL2 T Y S T D R ICL2ECL2 N E K C W F G K R P G V Y ECL2ICL3 R A S T T ICL3ECL3 N P G E D ECL3N-term M G G H P Q L R L V K A L L L L G L N P V S A S L Q D Q H C E S L S L A S N I S G L Q C N A S V D L I G T C W P R S P A G Q L V V R P C P A F F Y G V R Y N T T N N G Y R E C L A N G S W A A R V N Y S E C N-termC-term R A M S I P T S P T R V S F H S I K Q S T A V C-term Q E I L N E E K K S K V H Y H V A V I I N Y L G H C I S L V A L L V A F V L F L R L C L R N I I H W N L I S A F I L R N A T W F V V Q L T V G W C R L V T A A Y N Y F H V T N F F W M F G E G C Y L H T A I V L L R K W M F I C I G W G V P F P I I V A W A I G K L Y Y D T D Y I Y Q G P M I L V L L I N F I F L F N I V R I L M T K L S E T I Q Y R K A V K A T L V L L P L L G I T Y M L F F V E V S R V V F I Y F N S F L E S F Q G F F V S V F Y C F L N S E I R K W Q D R A R V R S A R W H R K H S I V A

MUTATIONS

Position Wild-type Mutated
120 |  V A
144 |  L A
156 |  W A
160 |  S A
228 |  K A
260 |  F A
277 |  I A
309 |  Y A
330 |  F A
349 |  S A
363 |  Y A

DELETIONS

  • from 1 to 103
  • from 221 to 223
  • from 374 to 415

    • MODIFICATIONS


    AUXILIARY PROTEINS

    Protein_type: fusion

    Name: T4 Lysozyme (T4L)
    Sequence: None
    Deletions:
    Positions: Within Receptor_0 220:221
    Presence in Crystal:YES
    Remarks: None

    Protein_type: linker

    Name: AAA
    Sequence: None
    Deletions:
    Positions: C-term_1 None:None
    Presence in Crystal:YES
    Remarks: None

    Protein_type: tag

    Name: His(10)
    Sequence: None
    Deletions:
    Positions: C-term_2 None:None
    Presence in Crystal:YES
    Remarks: None

    EXPRESSION

    Expression method Host cell type Host cell Remarks
    Baculovirus Hi5 Insect Trichoplusia ni (High Five) cells

    SOLUBILIZATION

    Solvent type Item Concentration
    detergent DM 2 %w/v

    Remarks:

    PURIFICATION

    Purification type Description
    NONE None

    Remarks:None

    CRYSTALLIZATION

    METHOD: in meso/LCP
    TYPE: lipidic cubic phase (LCP) (monoolein (9.9 MAG))
    PROTEIN CONCENTRATION: 20-30 mg/ml
    Temperature: 22.5°C
    ph : 5.5-5.5

    Remarks: The final protein:lipid ratio was 1:1.5 (w/w)

    Chemical lists

    Type Item Concentration
    Additional
    unknown Na-citrate, pH 5.5 100 mM
    unknown Li2SO4 200 mM
    unknown PEG400 30 %v/v
    Detergent
    detergent DM 0.15 % w/v